Estabilidad de analitos conservados en tubo cerrado con film versus cerrado con tapa plástica / Stability of analytes stored in a tube sealed with film versus closed with plastic cap

Introducción: El laboratorio debe garantizar la estabilidad de las muestras conservadas con la finalidad de una eventual confirmación de resultados o corregir posibles errores u omisiones al ingresar las solicitudes médicas. Con este objetivo se comparó la estabilidad de los analitos de muestras conservadas en el tubo primario selladas con film contra cierre con tapa plástica. Material y métodos: Veinticuatro muestras de sangre fueron alicuotadas en dos tubos primarios, uno cerrado con tapa plástica y otro con film. A ambas alícuotas se les midieron 26 analitos de química clínica durante siete días consecutivos, en un autoanalizador Cobas c 501 de Roche y se conservaron en refrigerador a 2-8°C. Se calcularon los coeficientes de variación y el error total. Los resultados obtenidos se compararon con el requisito de calidad respectivo establecido por el laboratorio. Conclusiones: Se observó una mayor variabilidad en los tubos cerrados con film respecto de los cerrados con tapa plástica. Todas las enzimas evaluadas cumplieron el requisito de calidad durante 4 días. A excepción del hierro todos los iones fueron estables solo un día. Los metabolitos fueron estables durante una semana a excepción de glucosa, proteínas totales, ácido úrico y albúmina. Se recomienda que cada laboratorio evalúe la estabilidad de los analitos en base a su forma de trabajo

Introduction: The laboratory must be able to guarantee the stability of stored patient samples for confirmation of results or errors in the interpretation of the medical request. The aim of this study was to evaluate the stability of the blood analytes preserved in tubes sealed with film versus a plastic cap. Material and methods: A total of 24 blood samples were aliquoted into two tubes; one sealed with film, and the other with a plastic cap. Twenty-six clinical chemistry analytes were measured for 7 consecutive days using a Roche Cobas c 501 autoanalyser. The samples were stored in a refrigerator between 2-8C. The total error and coefficient of variation were calculated, and the results were compared against the quality requirements of the laboratory. Conclusions: The variation was higher in the tubes sealed with film than in those with a plastic cap. Enzymes remained within the quality requirements for four days, and ions, apart from iron, were stable for only one day. The metabolites were stable for seven days excluding glucose, uric acid, total proteins, and albumin. It is suggested that each laboratory must evaluate the stability of analytes based on its workflow

Liposomes as potential carriers for ketorolac ophthalmic delivery: formulation and stability issues / Liposomes as potential carriers for ketorolac ophthalmic delivery: formulation and stability issues

ABSTRACT Drug delivery to treat ocular disorders locally is a challenging endeavor. Traditional ocular dosage form - eye drops - exhibits poor availability, consequently inefficient therapeutic response. The objective of the study was to formulate and characterize a ketorolac tromethamine ocular system with a prolonged release pattern based on liposomes as a vesicular carrier and to design once daily liquid preparation realizing the thermal in situ gelation principle. Liposomes were prepared by film hydration method. The influence of cholesterol concentration, pH and volume of hydration medium, and type and concentration of charging imparting agents were studied. Liposomes were characterized via, morphological examination, vesicular size, and encapsulation efficiency, and in vitro release performance, moreover its stability was assessed. The results obtained highlighted that liposomes showed a closed vesicular multi-lamellar structure. Ketorolac was successfully encapsulated within the liposomal structure in a cholesterol and charge inducing agent concentration-dependent behaviour. The dispersion of liposomes within thermosensitive Poloxamer in situ gel was able to retard the release of the drug by diffusion providing a controlled prolonged delivery. The liposomal formulations were physically stable for six months. Ketorolac tromethamine in situ liposomal gel representing an efficient alternative in terms of ocular retention and patient compliance when compared with conventional eye drops.

Evaluación de la estabilidad del sistema de diagnóstico inmunoenzimático DAVIH VIH-2 / Evaluation of the stability of the immunoenzymatic diagnostic system DAVIH VIH-2

Introducción: el estudio de la estabilidad de los componentes y el producto terminado constituye un importante requisito regulatorio en los diagnosticadores. Objetivo: realizar un estudio de estabilidad en tiempo real durante doce meses del sistema inmunoenzimático (ELISA) DAVIH VIH-2. Métodos: se realizó un estudio de estabilidad en tiempo real durante doce meses en tres lotes del diagnosticador DAVIH VIH-2, ELISA indirecto diseñado para la detección de anticuerpos contra el virus de inmunodeficiencia humana tipo 2 en suero o plasma humano. Se controlaron los requisitos de calidad de los componentes de acuerdo a sus especificaciones. Se estudió la normalidad de valores de densidad óptica/valor límite y la homogeneidad de las medias y varianzas mediante las dócimas de Grubbs y Cochran. Se estimó la precisión en los controles positivo y negativo del sistema y en seis muestras con diferente reactividad al virus de inmunodeficiencia humana tipo 2 mediante el cálculo del coeficiente de variación y se confeccionaron las cartas de control de los valores de las medias de densidad óptica respecto al tiempo. Resultados: los requisitos de calidad de cada componente se cumplieron durante 12 meses, excepto las características funcionales del conjugado a partir de los seis meses. Los valores en las dócimas de Grubbs y Cochran fueron menores que los valores críticos tabulados para α del 1 y 5 por ciento por lo que existió homogeneidad en las medias y las varianzas en todo el periodo. El coeficiente de variación se mantuvo inferior al 10 por ciento excepto en las muestras con reactividad media y baja, mientras que en las cartas de control, los valores de densidad óptica se mantuvieron en el límite de la media ±2 desviaciones estándar hasta el noveno mes(AU)

Estabilidade do ácido peracético no processo de desinfecção prévia à lavagem / Peracetic acid stability in disinfection process prior to wash

Objetivo: Avaliar a efetividade antimicrobiana e a estabilidade de formulações de ácido peracético com (Apc) e sem inibidor (Aps) de corrosão. Materiais e Métodos: Corpos de prova em aço inoxidável foram contaminados com Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Candida albicans, sangue e saliva e imersos em ácido peracético (Aps e Apc) por dez, quinze e trinta minutos. Após estes períodos, Apc e Aps foram neutralizados, agitados durante um minuto e a suspenção obtida foi semeada (ágar sangue), incubada (24h/37 °C) e as unidades formadoras de colônia (UFC) contadas. Este procedimento foi realizado seis vezes ao dia por 18 dias não consecutivos por um período de trinta dias. Corpos de prova contaminados e não submetidos à desinfecção foram utilizados como grupo controle. Resultados: Houve redução significativa das médias diárias de crescimento dos microrganismos para os dois grupos teste (Aps e Apc) quando comparados ao grupo controle (p= 0,0000) sem diferença estatística significativa entre eles (p= 0,7517). Conclusão: As duas soluções de ácido peracético mostraram-se eficientes no processo de desinfecção, sendo a solução sem inibidor de corrosão estável por um período maior...

Objective: To evaluate the stability of formulations of peracetic acid with (Apc) and without inhibitor (Aps) of corrosion in the disinfection process prior to washing. Materials and Methods: Specimens of stainless steel were contaminated with Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Candida albicans, blood and saliva and immersed in peracetic acid (Aps and Apc) for ten, fifteen and thirty minutes. After these periods, Aps and Apc were neutralized, stirred and the suspension obtained was seeded (blood agar) incubated (24h/37°C) and colony forming units counted. This procedure was carried out six times a day for 18 consecutive days for a period of thirty days. Contaminated specimens and not disinfected were used as control group. Results: There was significant reduction in the daily growth average of microorganisms for the two test groups (Aps and Apc) when compared to control group (p = 0.0000) with no significant statistical difference between them (p = 0.7517). Conclusion: The two solutions of peracetic acid were effective in the disinfection process, with the solution without corrosion inhibitor stable for a longer period...

Amaranthaceae pollens: review of an emerging allergy in the mediterranean area

The Amaranthaceae family is composed of about 180 genera and 2500 species. These common weeds have become increasingly relevant as triggers of allergy in the last few years, as they are able to rapidly colonize salty and arid soils in extensive desert areas. The genera Chenopodium, Salsola, and Amaranthus are the major sources of pollinosis from the Amaranthaceae family in southern Europe, western United States, and semidesert areas of Saudi Arabia, Kuwait, and Iran. In Spain, Salsola kali is one of the most relevant causes of pollinosis, together with olive and grasses. To date, 9 Amaranthaceae pollen allergens from Chenopodium album, Salsola kali, and Amaranthus retroflexus have been described and are listed in the International Union of Immunological Societies allergen nomenclature database. The major allergens of Amaranthaceae pollen belong to the pectin methylesterase, Ole e 1-like, and profilin panallergen families, whereas the minor allergens belong to the cobalaminindependent methionine synthase and polcalcin panallergen families. These relevant allergens have been characterized physicochemically, and immunologically at different levels. Recombinant forms, allergenic fusion recombinant proteins, and hypoallergenic derivatives of these allergens have been expressed in bacteria and yeast and compared with their natural proteins from pollen. In this review, we provide an extensive overview of Amaranthaceae pollen allergens, focusing on their physicochemical, and immunological properties and on their clinical significance in allergic patients. We also review studies where these recombinant allergens and their hypoallergenic derivatives have been used in clinical diagnosis and their potential use in personalized therapy (AU)

La familia Amaranthaceae se compone de alrededor de 180 géneros y 2500 especies vegetales. En los últimos años, el polen de estas malezas está adquiriendo una relevancia cada vez mayor como inductor de alergia, ya que estas plantas son capaces de colonizar rápidamente los suelos salinos y áridos de zonas desertificadas. El polen de los géneros Chenopodium, Salsola y Amaranthus es el causante del mayor número de casos de polinosis asociados a la familia Amaranthaceae en países del sur de Europa, oeste de Estados Unidos, y en las zonas semi-desérticas de Arabia Saudí, Kuwait o Irán. En España, el polen de Salsola kali es una de las causas más relevantes de polinosis junto con los pólenes de olivo y gramíneas. Hasta la fecha, se han descrito un total de nueve alérgenos del polen de Chenopodium album, Salsola kali y Amaranthus retroflexus, los cuales se han depositado en la base de datos de nomenclatura de alérgenos IUIS. Los alérgenos principales del polen de la familia Amaranthaceae pertenecen a las familias pectin metilesterasa, Ole e 1, o a la familia de panalérgenos -profilina-, mientras que los alérgenos secundarios descritos pertenecen a la familia de panálergenos -polcalcina-, o bien, corresponden a la metionina sintasa independiente de cobalamina. Estos relevantes alérgenos se han caracterizado fisicoquímica e inmunológicamente en mayor o menor profundidad. Las formas recombinantes, y sus variantes recombinantes o derivados hipoalergénicos fusionados a un tag, se han expresado en bacteria o levadura y se ha comparado su funcionalidad con sus correspondientes homólogos naturales presentes en el polen. En esta revisión, ofrecemos una extensa descripción de los alérgenos del polen de la familia Amaranthaceae, centrándonos en sus propiedades físico-químicas e inmunológicas, y en su importancia clínica en los pacientes alérgicos. Por otra parte, también hemos revisado aquellos estudios en donde se han utilizado estos alérgenos recombinantes y sus derivados hipoalergénicos en el diagnóstico clínico, o bien, en donde se describe su potencial uso en la terapia personalizada (AU)

Estabilidade dos anticorpos anti-HIV em amostras de soro armazenadas por períodos de dois a dezoito anos / Stability of anti-HIV antibodies in serum samples stored for two to eighteen years periods

Introduction: The antibodies have an important role in the serodiagnosis, constituting the most widely used biomarkers to detect and confirm various diseases. Objective: To investigate the reproducibility of anti-human immunodeficiency virus (HIV) antibodies reactivity, to assess the stability of the sera samples stored at -20ºC for two to eighteen years. Method: Sera were collected in the period 1988-2004 for routine anti-HIV antibodies diagnostic testing. The remaining samples stored at -20ºC, were analyzed in this study. Serum sample stability was assessed by enzyme-linked immunosorbent assay/enzyme immunoassay (ELISA/EIA), indirect immunofluorescence assay (IFA), and Western blot (WB) for detecting anti-HIV antibodies. The previously found results (1988-2004) and those obtained in 2006 were subjected to Kappa index analysis. Result: In the period 1988-to 2004, the degree of concordance of the ELISA/EIA, IFA and WB results were considered, good (k = 0.80), regular (k = 0.35), and good (k = 0.63), respectively. Conclusion: Regarding HIV serologic test, the serum samples were stable for 18 years in ELISA/EIA and for 4 years in IFA technique, however, for the WB methodology it was not possible to determine the time of stability of the anti-HIV antibodies...

Introdução: Os anticorpos possuem papel fundamental no sorodiagnóstico e constituem os mais difundidos biomarcadores empregados na detecção e na confirmação de diversas doenças. Objetivo: Verificar a reprodutibilidade dos resultados de anticorpos contra o vírus da imunodeficiência humana (HIV) para avaliar a estabilidade dos soros armazenados a -20ºC durante período de dois a dezoito anos. Método: Os soros utilizados foram provenientes de amostras remanescentes da rotina diagnóstica para detecção de anticorpos anti-HIV, no período de 1988 a 2004, os quais estavam armazenados em freezer a -20ºC. A estabilidade das amostras de soro foi avaliada por meio de enzyme-linked immunosorbent assay/enzyme immunoassay (ELISA/EIA), imunofluorescência indireta (IFI) e Western blot (WB) para detecção de anticorpos anti-HIV, e os resultados dos testes realizados anteriormente (1988-2004) e os obtidos em 2006 foram submetidos à análise do índice Kappa. Resultado: No período de 1988-2004, os graus de concordância dos resultados do ELISA/EIA, IFI e WB foram considerados, respectivamente, bom (k = 0,80), regular (k = 0,35) e bom (k = 0,63). Conclusão: No que diz respeito à sorologia para HIV, as amostras de soro foram estáveis por 18 anos no ELISA/EIA e por quatro anos na técnica de IFI, no entanto, para a metodologia de WB, não foi possível determinar o tempo de estabilidade dos anticorpos anti-HIV...

Estabilidade dos soros para o controle de qualidade interno de testes imunodiagnósticos de HIV/AIDS / Study on the stability of internal quality control sera for HIV/AIDS immunodiagnostic tests

Introduction: The use of reference materials in order to assure and perform the quality control of analytical measurements is a requirement in clinical laboratories. Objectives: Stability of serum samples, kept frozen at -20°C for long-term storage and at varied temperatures during short periods, was evaluated by investigating the persistency of anti-human immunodeficiency virus (HIV) antibodies reactivity on enzyme-linked immunosorbent assay/enzyme immunoassay (ELISA/EIA), Western blot and indirect immunofluorescence assays. Method: The analyzed sera were part of serum panels (comprised of anti-HIV positive and negative samples), produced at the Immunology Center of Instituto Adolfo Lutz, which have been the reference specimens for producing the internal quality assurance sera of HIV/acquired immunodeficiency syndrome (AIDS) immunodiagnostic assays. Sera stability was assessed in samples stored at -20°C for 56 weeks, and at various temperature conditions: from 2°C to 8°C (refrigerator), from 15°C to 25°C (room temperature), at 37°C (incubator) and at -80°C (freezer) for 24 and 48 hours. The statistical analyses on HIV-negative serum samples (long-term storage) were significant (p < 0.05), and neither adverse effects on these samples as the occurrence of false-positive results nor false-negative results in HIV antibody positive sera were found in both studies. Conclusion: It was possible to conclude that the reference material remained stable for 48 hours at different temperatures (short-term) and it remained stable at -20°C for 56 weeks (long-term)...

Introdução: A utilização de materiais de referência para assegurar e desempenhar o papel de controle de qualidade das medições analíticas é requisito em laboratórios clínicos. Objetivo: O presente estudo avaliou a estabilidade das amostras de soro, armazenadas a -20°C por um longo período de tempo e durante curto prazo em diferentes temperaturas, quanto à invariabilidade da reatividade de anticorpos contra o vírus da imunodeficiência humana (HIV), por meio de enzyme-linked immunosorbent assay/enzyme immunoassay (ELISA/EIA), Western blot e imunofluorescência indireta. Método: As amostras analisadas foram provenientes de painéis de soros (constituídos de amostras anti-HIV positivo e negativo), produzidos no Centro de Imunologia do Instituto Adolfo Lutz (IAL), os quais têm sido material de referência para o preparo de amostras do controle de qualidade interno de testes imunodiagnósticos de HIV/síndrome da imunodeficiência adquirida (AIDS). A avaliação da estabilidade dos soros foi efetuada em amostras armazenadas a -20°C por 56 semanas e nas diferentes condições de temperaturas: de 2°C a 8°C (geladeira), de 15°C a 25°C (ambiente), 37°C (estufa) e -80°C (freezer), durante 24 e 48 horas. Os resultados das análises de tendência das amostras de soro HIV negativo (armazenamento de longo prazo) foram significantes (p < 0,05) e nenhum efeito adverso foi observado nessas amostras, como a ocorrência de resultados falso-positivos, tampouco foram detectados resultados falso-negativos em amostras de soro positivas para detecção de anticorpos anti-HIV em ambas as avaliações. Conclusão: Foi possível concluir que o material de referência manteve-se estável por 48 horas nas diferentes temperaturas (curto prazo) e permaneceu estável a -20°C por 56 semanas (longo prazo)...

Hypotensive effect and endothelium-dependent vascular action of leaves of Alpinia purpurata (Vieill) K. Schum

The aims of this study were to evaluate the chemical profile, vascular reactivity, and acute hypotensive effect (AHE) of the ethanolic extract of leaves of Alpinia purpurata (Vieill) K. Schum (EEAP). Its chemical profile was evaluated using HPLC-UV, ICP-OES, and colorimetric quantification of total flavonoids and polyphenols. The vascular reactivity of the extract was determined using the mesenteric bed isolated from WKY. AHE dose-response curves were obtained for both EEAP and inorganic material isolated from AP (IAP) in WKY and SHR animals. Cytotoxic and mutagenic safety levels were determined by the micronucleus test. Rutin-like flavonoids were quantified in the EEAP (1.8 ± 0.03%), and the total flavonoid and polyphenol ratios were 4.1 ± 1.8% and 5.1 ± 0.3%, respectively. We observed that the vasodilation action of EEAP was partially mediated by nitric oxide (·NO). The IAP showed the presence of calcium (137.76 ± 4.08 μg mg-1). The EEAP and IAP showed an AHE in WKY and SHR animals. EEAP did not have cytotoxic effects or cause chromosomic alterations. The AHE shown by EEAP could result from its endothelium-dependent vascular action. Rutin-like flavonoids, among other polyphenols, could contribute to these biological activities, and the calcium present in EEAP could act in a synergistic way.

Os objetivos deste estudo foram avaliar o perfil químico de folhas de Alpinia purpurata K. Schum (AP), assim como a reatividade vascular e o efeito hipotensor agudo (EHA) do extrato etanólico de folhas de AP (EEAP). Avliou-se o perfil químico utilizando-se HPLC-UV, ICP-OES e quantificação colorimétrica de flavonoides e polifenóis totais. A reatividade vascular foi determinada utilizando leito mesentérico isolado de ratos WKY. Curvas dose-resposta do EEAP e do material inorgânico da AP (IAP) foram realizadas em animais SHR e WKY. Determinaram-se a segurança citotóxica e mutagênica pelo teste de micronúcleos. Flavonoides tipo rutina foram quantificados no EEAP (1,8±0,03%) e flavonoide total e polifenóis foram de 4,1±1,8% e 5,1±0,3%, respectivamente. Observou-se ação vasodilatadora do EEAP, mediada parcialmente pelo óxido nítrico (·NO). O IAP revelou a presença de cálcio (137,76±4.08 μg.mg-1 de Ca). O EEAP e IAP apresentaram EHA em animais WKY e SHR. Não se observaram efeitos citotóxicos e alterações cromossômicas provocadas pelo EEAP. O EEAP mostrou um EHA que poderia resultar de ação vascular dependente do endotélio. Rutina, entre outros polifenóis e flavonoides, poderia estar contribuindo para essas atividades biológicas e o cálcio presente no EEAP, poderia agir de maneira sinérgica.

Evaluación preclínica y estudio de estabilidad de extractos a partir del follaje de Momordica charantia Lin / Obtaining and characterizing the Momordica charantia Linn leaf extracts

El objetivo del presente trabajo fue la evaluación preclínica y el estudio de estabilidad de extractos a partir del follaje de Momordica charantia Lin. Se obtuvieron extractos acuoso e hidroalcohólico para los cuales se establecieron las especificaciones de calidad mediante la evaluación de tres lotes y se estudió su estabilidad por el método de vida de estante durante 12 meses. A los extractos se le evaluó el potencial genotóxico mediante ensayos de micronúcleos en médula ósea de ratón y aberraciones cromosómicas en linfocitos de sangre periférica. La actividad hipoglicemiante oral fue evaluada en animales con hiperglicemia temporal inducida por carga de glucosa. Como resultados se establecieron las especificaciones de calidad de los extractos acuoso e hidroalcohólico, los mismos mostraron estabilidad por 6 meses para el extracto acuoso y 12 meses para el extracto hidroalcohólico. No mostraron efecto genotóxico en los ensayos evaluados y mostraron efecto hipoglicemiante oral a la dosis de 450 mg/kg.

The objective of this investigation was the preclinical evaluation and the stability study of the Momordica charantia Linn hydroalcoholic and aqueous leaf extracts. The hydroalcoholic and aqueous extracts were obtained and the quality specifications were determined by evaluating three lots. The stability of the extracts was evaluated for 12 months. The genotoxic potential of the extracts was evaluated by mouse bone marrow micronucleus test and chromosome aberration test. The hypoglycemic effect was determined by oral glucose tolerance test. As results, the quality specifications were established and the aqueous extract was stable for 6 months and the hydroalcoholic extract for 12 months. A genotoxic effect was not observed in both extracts and the hypoglycemic effect was observed at the oral dose of 450 mg/kg of body weight.

Efeito da aplicação tópica de um verniz de TiF4 quimicamente estável na desmineralização do esmalte dentário bovino: estudo in vitro / Effect of topical application of a chemically stable TiF4 varnish on the demineralization of bovine enamel: an in vitro study

Objetivo: Avaliar, in vitro, o efeito preventivo da aplicação tópica de um verniz à base de tetrafluoreto de titânio quimicamente estável e de um verniz à base de fluoreto de sódio sobre o esmalte bovino, mediante ciclagem de pH. Metodologia: A amostra foi constituída por 75 blocos de esmalte bovino 3×3 mm, sendo 15 aleatoriamente alocados em cada um dos cinco grupos: G1: Dentifrício Fluoretado + Verniz sem princípio ativo; G2: Dentifrício Fluoretado + Verniz à base de TiF4 (4 minutos); G3: Dentifrício Fluoretado + Verniz à base de TiF4 (24 horas); G4: Dentifrício Fluoretado + Verniz à base de NaF (24 horas); G5: Dentifrício Fluoretado. A ciclagem de pH foi realizada por um período de 14 dias, constando de oito ciclos, a 37 °C. Os blocos tratados foram mantidos em solução desmineralizante por oito horas e, por 16 horas, em solução remineralizante, sendo submetidos à análise da superfície em microscopia eletrônica de varredura e espectroscopia de energia dispersiva. Resultado: O verniz à base de TiF4 promoveu uma maior proteção ao esmalte quando comparado com os demais grupos. Mesmo após o período de ciclagem, foram encontrados fósforo, cálcio, sódio, magnésio, titânio, cloro, silício, alumínio, enxofre, potássio, oxigênio e flúor na superfície do esmalte. Conclusão: O aspecto da estrutura adamantina submetida à ação do tetrafluoreto de titânio revelou a presença de uma película protetora. O cálcio e o fósforo foram os principais compostos inorgânicos encontrados no esmalte, sendo observadas alterações na constituição química da camada superficial adamantina em função do tratamento com fluoreto instituído.

Objective: To evaluate the in vitro preventive effect of topical application of achemically stable titanium-tetrafluoride (TiF4) varnish and a sodium fluoride (NaF) varnish on bovine enamel by pH cycling test. Methodology: The sample consisted of 75 blocks of bovine enamel measuring 3x3mm, which were randomly assigned to 5 groups of 15, as follows: G1: Fluoridated dentifrice + varnish without active principle; G2: fluoridated dentifrice + TiF4 varnish (4 minutes); G3: fluoridated dentifrice + TiF4 varnish (24 hours); G4:fluoridated dentifrice + NaF varnish (24 hours); G5: fluoridated dentifrice.A pH cycling was carried out for a period of 14 days, consisting of 8 cycles at 37 °C. The treated blocks were kept in demineralizing and remineralizing solutions for 8 and 16 hours, respectively, being then subjected to surface analysis under scanning electron microscopy and dispersive energy spectroscopy. Result: The TiF4 varnishshowed a greater protection to enamel when compared with the other groups.Even after the cycling period, the following elements were found on the enamel surface: phosphorus, calcium, sodium, magnesium, titanium, chlorine, silicon, aluminum, sulfur, potassium, oxygen and fluorine. Conclusion: The adamantine structure subjected to the action of titanium tetrafluoride revealed the presence of a protective pellicle.Calcium and phosphorus were the major inorganic compounds found in enamel. Furthermore, there were changes in the chemical composition of the adamantine surface layer as a result of the treatment with fluoride.

Determinação de fumonisina B1 por CLAE: estudo da estabilidade do derivado fumonisina B1-orto-ftaldialdeído / Determination of fumonisin B1 by HPLC: stability study of the fumonisin B1-ortho-phthaldialdehyde derivative

Este estudo avaliou a estabilidade do derivado fumonisina B1-orto-ftaldialdeído sob diferentes condições de pH, tempo e temperatura, durante a reação de derivatização e as análises cromatográficas. Na derivatização, a máxima fluorescência emitida pelo derivado foi obtida empregando-se a solução de tetraborato de sódio 0,1 M em pH 9,0, e esta não diferiu significativamente das emitidas em pH 8,0, 8,5,9,5 e 10,0. Em 2 minutos de reação, obteve-se a máxima fluorescência, e esta não diferiu significativamente das emitidas em 4, 6 e 8 minutos de reação. A variação de 0,5 unidade no pH da solução tampão fosfato de sódio 0,1 M, empregada como fase móvel, influenciou significativamente na separação cromatográfica e na detecção do derivado fumonisina B1-orto-ftaldialdeído; em pH entre 3,3 e 3,8, obtiveram-se as maiores intensidades de fluorescência. O aumento na temperatura da coluna cromatográfica resultou na redução de intensidade da fluorescência. O derivado fumonisina B1-orto-ftaldialdeído manteve-se estável entre 20 e 27 °C. A 30 °C, houve redução significativa em 26,5% na intensidade da fluorescência emitida pelo derivado.

Evaluación de una estrategia de conservación para Brevundimonas diminuta / Assessment of a preservation strategy for Brevundimonas diminuta

Brevundimonas diminuta se reconoce internacionalmente como el microorganismo estándar para las pruebas de reto bacteriano. El Laboratorio de Control de la Calidad de los Laboratorios Liorad dispone de una colección de cepas de referencia donde se encuentra depositada esta cepa, conservada por el método de congelación a -70oC, replicada en el medio de cultivo Caldo Lactosa Salina (CLS). Esta metodología no resultó la más conveniente, por lo que se evaluó otra estrategia de conservación para este microorganismo, donde se empleó el Caldo Triptona Soya como medio de crecimiento, la leche descremada al 20 por ciento como sustancia lioprotectora y la liofilización como método de conservación. Para verificar el sustento del cultivo se realizó un adecuado control de la calidad que incluyó la comprobación de pureza y la viabilidad y estabilidad de las propiedades de interés. Los resultados obtenidos durante los 24 meses en que se llevó a cabo el estudio de estabilidad en tiempo real confirmaron que el método elegido brindaría una alternativa y solución al problema relacionado con la conservación de esta cepa(AU)

Brevundimonas diminuta is internationally recognized as the standard micro-organism for bacterial challenge tests. The Quality Control Laboratory of Liorad Laboratories has a collection of reference strains, among them Brevundimonas diminuta are kept by the freezing method at -70oC, replicated in Lactose Broth Saline (CLS) culture medium. This methodology was not the most convenient, that is why another strategy was assessed. Triptone Soy Broth was used as growth method, skim milk 20percent as protective substance and lyophilization as preservation method. An adequate quality control, which included purity verification, viability and stability of the properties, was carried out. Results obtained during the 24 months of the stability study in real time, suggest that the chosen method would provide an alternative and solution to the problem of this strain preservation(AU)

Influencia de los polimorfismos de CYP2C19 en la reactividad plaquetaria y el pronóstico en una población no seleccionada de pacientes con síndrome coronario agudo sin elevación del ST / Influence of CYP2C19 polymorphisms in platelet reactivity and prognosis in an unselected population of non ST elevation acute coronary syndrome

Introducción y objetivos. Los alelos CYP2C19*2 y *17 parecen relacionarse con la variabilidad en el metabolismo del clopidogrel. Los objetivos del presente estudio son valorar la relación fenotipo-genotipo asociada a los polimorfismos CYP2C19*2 y *17 y explorar el impacto clínico de estos polimorfismos durante 6 meses de seguimiento en una población no seleccionada con síndrome coronario agudo sin elevación del segmento ST. Métodos. Se reclutó a 40 pacientes estables doblemente antiagregados, 12 meses después del implante de stent coronario para el primer objetivo, y a 493 pacientes ingresados con síndrome coronario agudo sin elevación del segmento ST para el segundo. La reactividad plaquetaria se evaluó mediante agregometría óptica estimulando las plaquetas con adenosina difosfato o péptido activador del receptor de trombina, y valorando la fosfoproteína estimulada por vasodilatadores fosforilada mediante citometría de flujo. El genotipo para los polimorfismos CYP2C19*2 y *17 se analizó con sondas TaqMan. Resultados. Sólo el test de fosforilación de fosfoproteína estimulada por vasodilatadores mostró diferencias significativas en la reactividad plaquetaria entre los pacientes portadores y no portadores de los alelos CYP2C19*2 (p=0,020) y *17 (p=0,048). No se observó asociación con el pronóstico a 6 meses de los alelos CYP2C19*2 ([HR (IC95%): 1 (0,94-1,55)], p=0,984) y *17 ([HR (IC95%): 0,93 (0,61-1,43)], p=0,753). Conclusiones. Los polimorfismos de CYP2C19 *2 y *17 se relacionaron con la reactividad plaquetaria, pero no con el pronóstico a 6 meses, en el que multitud de variables deben influir (AU)

Introduction and objectives. CYP2C19*2 and CYP2C19*17 alleles appear to contribute to heterogeneous clopidogrel metabolism. The aims of the present study were to assess the phenotype-genotype relationship of CYP2C19*2 and *17 allele carriage and to explore the clinical impact of those polymorphisms at 6-month follow-up of an acute event in an unselected population of non-ST elevation acute coronary syndrome. Methods. Recruitment for the first and second objectives was 40 stable acute coronary syndrome patients under dual antiplatelet therapy at 12 months after coronary stent placement and an unselected population of 493 consecutive patients with non-ST elevation acute coronary syndrome, respectively. Platelet reactivity was assessed by optical aggregometry induced by adenosine diphosphate and thrombin receptor activating peptide, and by vasodilator-stimulated phosphoprotein phosphorylation measurement using flow cytometry. Genotypes were determined with a TaqMan assay. Results. Only the vasodilator-stimulated phosphoprotein phosphorylation measurement detected significant differences in on-clopidogrel platelet reactivity between the wild-type subjects and the CYP2C19*2 (P=.020) and *17 allele carriers (P=.048). No significant difference was found between CYP2C19*2 ([HR (95%CI): 1 (0.94-1.55)], P=.984) or *17 ([HR (95%CI): 0.93 (0.61-1.43)], P=.753) allele carriage and the occurrence of adverse events at 6-month follow-up. Conclusions. Even though CYP2C19 genotype is associated with variable on-clopidogrel platelet reactivity, it has no significant clinical influence. Prognosis of acute coronary syndromes may be influenced by a myriad of variables (AU)

Avaliação da reatividade de fibroblastos provenientes de animais silicóticos: estabelecimento de sistema de cultura em 3D / Assessment of reactivity of fibroblasts from fibrotic animals: establishing 3D culture system

A silicose é uma doença pulmonar, de caráter restritivo, causada pela inalação de partículas de sílica cristalina. Se caracteriza pela indução de uma inflamação crônica associada à intensa proliferação de fibroblastos e acúmulo exacerbado de componentes de matriz extracelular, e para a qual não há um tratamento eficaz. Os fibroblastos são considerados alvos cruciais em doenças de natureza fibrótica e o desenvolvimento de sistemas que permitam avaliar a reatividade destas células é de fundamental importância na busca por terapias anti-fibróticas. No presente estudo foi desenvolvido um sistema de cultura primária em 3D (esferóides), utilizando fibroblastos provenientes do pulmão de camundongos normais e silicóticos objetivando analisar comparativamente os aspectos morfológicos/funcionais de ambas as populações celulares. Os fibroblastos foram obtidos a partir da dissociação mecânica/enzimática dos pulmões de camundongos Swiss-Webster 7 dias após a instilação intranasal de salina (controle) ou sílica (10 mg/animal). Após a terceira passagem, as células foram cultivadas em placas de 96 poços, revestidas com agarose, na ausência ou presença de IL-13 (40 ng/mL), sendo os esferóides avaliados quanto a aspectos morfológicos (tamanho/diâmetro médio/constituição), e funcionais tais como: proliferação, produção de citocinas (TGF-(beta)e quimiocinas (MCP-1)) e de colágeno. Através da análise por microscopia de luz invertida, verificamos que os esferóides contendo fibroblastosde animais normais e silicóticos mostraram progressiva diminuição do tamanho/diâmetro, e maior densidade, ao longo do tempo analisado (1 – 4 dias), com os silicóticos apresentando valores sempre superiores aos dos controles. A estimulação com IL-13 induziu claro aumento de tamanho/diâmetro em ambas as populações de esferóides. A análise por microscopia eletrônica de varredura (MEV) revelou haver diferenças morfológicas importantes entre os grupos normal e silicótico, no que tange ao formato e à constituição celular, com expressivo aumento no conteúdo de matriz extracelular detectado na condição de estimulação com IL-13. De forma interessante, foi observado que os esferóides silicóticos apresentaram níveis basais aumentados de proliferação celular e secreção de TGF-(beta), assim como de colágeno, em comparação aos dos controles. Tanto esferóides normais quanto silicóticos foram sensíveis à estimulação com IL-13, sendo verificado aumento equivalente na taxa de proliferação e nos níveis de TGF-(beta)e MCP-1 em ambos os grupos. No que tange a produção de colágeno, os esferóides normaismostraram-se responsivos à IL-13 enquanto os silicóticos não. Em conjunto, nossos achados mostraram que os fibroblastos pulmonares de camundongos adultos são:(i) passíveis de serem cultivados em sistema de cultura 3D; (ii) responsivos à estimulação com IL-13 e que; (iii) os esferóides silicóticos apresentam características de ativação em comparação aos normais. Além disso, este modelo mostrou-se reprodutível e promissor quanto a possibilidade de utilização futura na busca por compostos com atividade anti-fibrótica.

In vitro study on the interaction of ketotifen fumarate with anhydrous theophylline

The purpose of the present study was to investigate the interaction between ketotifen fumarate and anhydrous theophylline in aqueous media of various pH (1.2 and 6.8). Using Job's continuous-variation analysis and Ardon's spectrophotomeric measurement methods, the values of the stability constants of theophylline with ketotifen were determined at a fixed temperature (37 ºC) at various pH. The stability constants, ranging between 5.66 and 9.92, were derived from Ardon's plot, indicating that comparatively stable complexes had formed as a result of an interaction between the drugs. However, following the interaction of theophylline with ketotifen, stability constants were <1 at gastric pH (1.2) and intestinal pH (6.8). Concurrent administration of ketotifen and theophylline could result in the formation of a stable complex and this is likely to reduce the therapeutic activities of both drugs.

O objetivo do presente estudo foi investigar a interação entre o fumarato de cetotifeno e a teofilina anidra em meios aquosos com vários pH (1,2 e 6,8). Utilizando a análise da variação contínua de Job e os métodos de medida espectrofotométrica de Ardon, os valores das constantes de estabilidade da teofilina com o cetotifeno foram determinados em temperatura fixa (37 oC) em vários pH. As constantes de estabilidade, variando entre 5,66 e 9,92 derivaram-se a partir do delineamento de Ardon, indicando, comparativamente, que complexos estáveis se formaram como resultado da interação entre os fármacos. Entretanto, seguindo a interação da teofilina com o cetotifeno, as constantes de estabilidade foram <1, em pH gástrico (1,2) e intestinal (8,8). A administração concomitante de cetotifeno e teofilina poderia resultar na formação de complexo estável, o que reduz a atividade terapêutica de ambos os fármacos.

Thermal sensitivity and cardiovascular reactivity to stress in healthy males

This paper examines the association of cardiovascular reactivity with thermal thresholds (detection and unpleasantness). Heart period (HP), systolic (SBP) and diastolic (DBP) blood pressure of 42 health young males were recorded during a cardiovascular reactivity task (a videogame based upon Sidman’s avoidance paradigm). Thermal sensitivity, assessing detection and unpleasantness thresholds with radiant heat in the forearm was also estimated for participants. Participants with differential scores in the cardiovascular variables from base line to task >=P65 were considered as reactors and those how have differential scores <= P35 were considered as non-reactors. Significant differences were observed between groups in the unpleasantness thresholds in blood pressure (BP) but not in HP. Reactors exhibited significant higher unpleasantness thresholds than non-reactors. No significant differences were obtained in detection thresholds between groups (AU)

Este estudio investiga la relación entre la reactividad cardiovascular y la sensibilidad térmica (umbrales de detección y molestia). 42 varones jóvenes y sanos participaron en un experimento en el que se registraron el periodo cardiaco, la presión arterial sistólica y la presión arterial diastólica durante la realización de una tarea evocadora de reactividad cardiovascular (videojuego basado en el paradigma de evitación de Sidman). La sensibilidad térmica fue medida en todos los participantes mediante la estimación de los umbrales de detección y molestia en la piel del antebrazo con el método de calor radiante. Los participantes que presentaron valores diferenciales en las variables cardiovasculares respecto a la línea base >= P65 fueron considerados como reactores, mientras que los que obtuvieron valores diferenciales <= P35 se consideraron como no-reactores. Se encontraron diferencias significativas en los umbrales de molestia entre los grupos de reactores y no-reactores en presión arterial, aunque no se encontraron diferencias en la reactividad del periodo cardiaco. El grupo de reactores presenta umbrales más elevados en la molestia que el grupo de no-reactores. No se encontraron diferencias en los umbrales de detección entre los grupos (AU)

Condição sociossexual de uma população de pôneis da raça Brasileira / Social-sexual condition of the Brazilian Pony Breed population

A formação dos haréns em pôneis envolve variáveis como as concentrações plasmáticas de testosterona, a idade e a dominância entre garanhões. Os objetivos deste estudo foram verificar a estabilidade e a repetibilidade da composição dos haréns e as relações entre as concentrações plasmáticas de testosterona e a condição sociossexual dos reprodutores. A estabilidade dos haréns dependeu do status reprodutivo das fêmeas. A presença de éguas gestantes no harém levou a uma maior estabilidade, enquanto que as em estro, ao procurarem outros garanhões para serem cobertas, provocaram instabilidade. A condição de dominante do garanhão foi importante para a manutenção do número de éguas no seu harém. Todos os garanhões tiveram as suas concentrações plasmáticas médias de testosterona aumentadas, em média, 77,6 por cento, quando foram expostos às éguas e quando formaram haréns (85,6 por cento), enquanto que os do grupo de solteiros tiveram as concentrações mais baixas. Portanto, fatores envolvidos na formação e estabilidade dos haréns nas populações selvagens parecem também exercer influência nas domesticadas e, consequentemente, podem interferir no desempenho destes animais durante a estação reprodutiva.(AU)

The formation of harems in ponies involves factors as testosterone level of stallion, age and dominance. The objectives were to verify the stability and repeatability of the composition of harems and the relationships between plasmatic levels of testosterone and the social-sexual condition of the stallions. The stability of harems depended of reproductive status of females and dominance of stallion. All the stallions had their mean testosterone plasmatic levels increased, in average, 77, 6 percent, when were exposed to the mares, and when they formed harems (average of 85, 6 percent), while the stallions of bachelor group had lower levels.(AU)

Condição sociossexual de uma população de pôneis da raça Brasileira / Social-sexual condition of the Brazilian Pony Breed population

A formação dos haréns em pôneis envolve variáveis como as concentrações plasmáticas de testosterona, a idade e a dominância entre garanhões. Os objetivos deste estudo foram verificar a estabilidade e a repetibilidade da composição dos haréns e as relações entre as concentrações plasmáticas de testosterona e a condição sociossexual dos reprodutores. A estabilidade dos haréns dependeu do status reprodutivo das fêmeas. A presença de éguas gestantes no harém levou a uma maior estabilidade, enquanto que as em estro, ao procurarem outros garanhões para serem cobertas, provocaram instabilidade. A condição de dominante do garanhão foi importante para a manutenção do número de éguas no seu harém. Todos os garanhões tiveram as suas concentrações plasmáticas médias de testosterona aumentadas, em média, 77,6 por cento, quando foram expostos às éguas e quando formaram haréns (85,6 por cento), enquanto que os do grupo de solteiros tiveram as concentrações mais baixas. Portanto, fatores envolvidos na formação e estabilidade dos haréns nas populações selvagens parecem também exercer influência nas domesticadas e, consequentemente, podem interferir no desempenho destes animais durante a estação reprodutiva.

The formation of harems in ponies involves factors as testosterone level of stallion, age and dominance. The objectives were to verify the stability and repeatability of the composition of harems and the relationships between plasmatic levels of testosterone and the social-sexual condition of the stallions. The stability of harems depended of reproductive status of females and dominance of stallion. All the stallions had their mean testosterone plasmatic levels increased, in average, 77, 6 percent, when were exposed to the mares, and when they formed harems (average of 85, 6 percent), while the stallions of bachelor group had lower levels.

Anafilaxia após ingestão de mandioca em pacientes com alergia ao látex: relato de 2 casos / Anaphylaxis after ingestion of manioc in patients with allergy to latex: reprt of 2 cases

Objective: To report the first cases in our country of patients with latex allergy who developed anaphylaxis with urticaria and bronchospasm after eating maníoc, suggesting the presence of cross-reactivity between these allergens. Methods: Latex allergy was confirmed by assessing specific IgE through in vivo (prick tests) and in vitro (ImmunoCAP) tests. 5kin tests to aeroallergens, manioc and other foods were also conducted. Allergy to manioc was confirmed with oral challenge tests. ImmunoCAP inhibition assays were performed with extract of manioc and latex to assess cross reactivity. Results: 5kin tests to aeroallergens were negative. The skin prick tests with commerciallatex extracts were positive in both patients. Prick-to-prick with raw and cooked manioc was also positive. Both patients had positive skin tests for fresh papava and one of them for pineapple. Tests were negative for banana, kiwi and chestnut. Both had high serum specific IgE to latex. Both patients had a reaction with the open challenge test with manioc. ImmunoCAP inhibition assays revealed cross-reactivity between latex and manioc. Conclusion: Although previous reports have already suggested cross-reactivity between latex and manioc, this is the first report of cross reactivity between these allergens in our country, and indicates that manioc should definitely be added to the growing Iist of foods that present cross-reactívity with latex.

Objetivo: Primeira descrição em nosso meio de reação anafilátíca, com urticária e broncoespasmo após a ingestão de mandioca (Manihot utilissima) em pacientes com alergia ao látex, sugerindo a presença de uma reatividade cruzada entre estes dois alérgenos. Métodos: A alergia ao látex foi confirmada através da pesquisa de IgE específica in vivo (testes de puntura) e in vitro (ImmunoCAP, PHADIA, Brasil). Testes cutâneos para aeroalérgenos comuns, mandioca e outros alimentos também foram realizados. A alergia a mandioca foi avaliada pela determinação de IgE específica in vivo e confirmada através de testes de provocação oral com a mandioca. Ensaios de inibição do ImmunoCAP foram realizados com extrato de mandioca e de látex para avaliar a reatividade cruzada. Resultados: Os testes cutâneos para aeroalérgenos comuns foram negativos. Os testes cutâneos de puntura com extratos comerciais de látex foram positivo em ambos os pacientes. Prick-to-prick com mandioca crua e cozida também foram positivos. Ambos tiveram testes cutâneos positivos para mamão fresco e um deles para abacaxi. Os testes foram negativos para a banana, kiwi e castanha. Ambos tinham níveis séricos elevados de IgE específica ao látex. Ambos os pacientes tiveram reação com a provocação aberta com a mandioca. Ensaios de inibição do ImmunoCAP revelaram reatividade cruzada entre o látex e mandioca. Conclusão: Esse é o primeiro relato de reação cruzada entre estes dois alérgenos no Brasil. Os resultados reforçam que a mandioca deve ser definitivamente adicionada à crescente lista de alimentos que apresentam reação cruzada com o látex da borracha.